Efeito dos exsudatos radiculares de Solanum Sisymbriifolium na enclosão de
Meloidogyne SPP
INTRODUÇÃO
Os nemátodes do género Meloidogyne,vulgarmente designados por nemátodes-das-
galhas-radiculares (NGR), constituem um dos grupos mais importantes de
fitoparasitas. Estes nemátodes são responsáveis por grandes prejuízos na
agricultura, tanto pelo seu efeito patogénico como pela grande diversidade de
culturas, com elevada importância económica, que parasitam.
Os NGR têm uma gama de plantas hospedeiras que inclui, praticamente, todas as
culturas hortícolas, frutícolas e plantas ornamentais, atacando raízes, bolbos
e tubérculos (Oka et al., 2000). Os sintomas mais característicos são a
presença de galhas nas raízes, reflectindo-se, sobretudo, no crescimento das
plantas, tornando-as mais vulneráveis à acção de outros agentes patogénicos e
provocando uma redução significativa na quantidade e na qualidade da produção
das culturas (Moens et al., 2009).
O ciclo de vida dos NGR, com seis estádios de desenvolvimento e quatro mudas,
completa-se em 22-30 dias, sendo directamente influenciado pela temperatura do
solo (Ferraz, 2001; Moens et al., 2009). O estádio infectivo é o jovem do
segundo estádio (J2) que, após a eclosão, migra no solo à procura de raízes de
plantas hospedeiras. Este estádio é uma fase extremamente importante no ciclo
de vida destes nemátodes e na sua inter-relação com o hospedeiro. Qualquer
factor que influencie este processo pode ter um efeito significativo na sua
sobrevivência, no tempo de duração da sua geração e na sua capacidade de
infectar o hospedeiro.
A investigação sobre meios de luta alternativos aos nematodicidas deve incidir
no manuseamento biológico do solo, juntamente com um conjunto de estratégias e
de medidas nas quais se encontram incluídas a rotação das culturas, com plantas
resistentes ou tolerantes, a consociação de culturas, com plantas não
hospedeiras ou antagonistas, e a utilização de plantas com propriedades
nematodicidas ou com a capacidade de atrair ou repelir nemátodes, através da
sua utilização como adubo verde, cultura armadilha ou em biofumigação (Luc et
al., 1990; Akhtar, 1997; Pestana et al., 2007).
Na rotação de culturas podem ser usadas plantas armadilha de dois tipos:
plantas susceptíveis, isto é, plantas atractivas para os nemátodes, funcionando
como ímans que atraem os nemátodes e que permitem a penetração destes nas
raízes, devendo ser destruídas, imediatamente, após a penetração dos nemátodes
nas raízes, de modo a não permitir a sobrevivência das novas gerações; ou
plantas onde os nemátodes não conseguem desenvolver-se, embora possam penetrar
nas raízes (Jairajpuri e Alam, 1990).
A utilização de plantas antagonistas naturais, inseridas em programas de
rotações de culturas ou consociações, parece ser um meio promissor no controlo
dos nemátodes. Existem as plantas antagonistas passivas, plantas não
hospedeiras, e as antagonistas activas que produzem exsudatos com princípios
nematodicidas e os libertam através das raízes (Jairajpuri e Alam, 1990). A
densidade populacional de nemátodes no solo diminui, de forma mais evidente,
quando se cultivam antagonistas activas a seguir à cultura hospedeira (rotação
activa).
Existem várias plantas, espontâneas e/ou cultivadas, em que os extractos e
exsudatos podem ter propriedades estimulantes, repelentes, nematostáticas e/ou
nematodicidas, que actuam antes ou após a penetração dos jovens nas raízes,
impedindo que o ciclo de vida se complete (Chatterjee et al., 1982; Dias-Areira
et al., 2003). Em relação aos NGR,têm sido referidas algumas plantas cujos
extractos e/ou exsudatos têm um efeito nematodicida ou nematostático,
provocando a morte dos nemátodes, inibindo a eclosão dos J2 ou impedindo a
penetração ou desenvolvimento do nemátode na planta (Hackney e Dickerson, 1975;
Galhano et al., 1997), como, por exemplo, Tagetesspp., Mucunaspp.,
Colocasiaspp., Brassicaspp. e algumas gramíneas (Galhano et al., 1997; Dias-
Arieira et al., 2003; Lopes et al., 2005; Campos et al., 2006). A redução da
eclosão de J2 de M. incognita foi demonstrada em exsudatos de raízes de capim-
pangola, Digitaria decumbens, e de M. javanicaem exsudatos de tomateiro,
Solanum lycopersicum, cafeeiro, Coffea arabica e soja, Glycine max (Haroon e
Smart, 1983; Rocha et al., 2004). A identificação de outros fitoquímicos
específicos, envolvidos nessas interacções, poderá trazer múltiplos benefícios,
nomeadamente, o de alguns poderem ser mais seguros para o ambiente e para o
homem em comparação com os nematodicidas tradicionais (Pascual-Villalobos,
1996).
Entre as plantas, com as propriedades referidas, encontra-se a espécie Solanum
sisymbriifolium(Lovatto et al., 2004) que tem vindo a alcançar protagonismo na
comunidade científica por se comportar como uma planta não hospedeira para um
importante número de pragas e doenças (Scholte e Vos, 2000) e que tem sido
utilizada como cultura armadilha no controlo dos nemátodes-de-quisto da
batateira (NQB), Globodera rostochiensis e G. pallida (Scholte, 2000).
O objectivo principal deste trabalho foi avaliar o efeito dos exsudatos
radiculares de quatro cultivares de S. sisymbriifolium (Sharp, Pion, Sis 4004 e
Domino) na eclosão de J2 de cinco isolados de Meloidogyne, contribuindo para o
desenvolvimento de estratégias alternativas, à utilização de nematodicidas,
mais eficazes e mais amigas do ambiente.
MATERIAL E MÉTODOS
Nos ensaios realizados foram utilizados cinco isolados de Meloidogyne, obtidos
em campos onde as plantas se encontravam infectadas (Quadro_1). Estes isolados
foram multiplicados emtomateiros (S. lycopersicum),cv. Easypeel, inoculados com
10 massasde ovos/vaso e mantidos numa estufa com fotoperíodo de 12 h,
temperatura variável entre 20-25ºC e humidade relativa entre 70-75%. Sessenta
dias após a inoculação, os tomateiros foram desenvasados, tendo-se procedido à
recolha de massas de ovos para os ensaios.
As plantas das quatro cultivares de S. sisymbriifolium(Domino, Pion, Sharp e
Sis 4004) e de tomateiro cv. Easypeel foram obtidas a partir de sementes. Os
exsudatos radiculares foram obtidos a partir de três plantas de cada uma das
cultivares de S. sisiymbriifolium e da cultivar de tomateiro através da
lixiviação sucessiva do solo que continha as plantas (Shepherd, 1986). Para
cada uma das cultivares, foi adicionado cerca de 1,5 L de água destilada ao
vaso de uma das três plantas, com os orifícios destapados. O lixiviado obtido
foi vertido para o vaso contendo a segunda planta e, depois de recolhido, para
o vaso contendo a terceira planta. Posteriormente, o lixiviado foi filtrado,
através de papel de filtro Whatmannº1, de modo a eliminar partículas de solo
arrastadas durante o processo de recolha, e colocado no frigorífico, num frasco
escuro, a 4ºC, até ser utilizado.
As massas de ovos, de cada um dos isolados de Meloidogyne, retiradas das raízes
de tomateiros cv. Easypeel infectadas, foram colocadas numa lâmina escavada com
água destilada, tendo sido seleccionados apenas os ovos que continham J2.
Os ensaios foram realizados com 15 ovos com J2, de cada um dos isolados, tendo
sido transferidos para blocos de vidro escavados esterilizados com 0,5 ml de
exsudato radicular. O exsudato radicular do tomateiro cv. Easypeel e a água
destilada foram utilizados como testemunhas. Os ensaios, com cinco repetições,
decorreram no escuro, numa câmara húmida, à temperatura de 22±2ºC.
As contagens do número de J2 eclodidos foram realizadas, de 24 em 24 h, durante
15 dias. Os J2 eclodidos foram sendo retirados do bloco de vidro, ao longo das
sucessivas contagens. Depois da última contagem, determinou-se a eclosão
percentual cumulativa, ou seja, o total de J2 eclodidos até ao 15º dia foram
convertidos em valores de inibição de eclosão percentual cumulativa segundo a
fórmula:
I = 100 ' E em que:
I = inibição da eclosão cumulativa (%)
E = eclosão cumulativa (%).
Foi, ainda, calculada a percentagem da inibição da eclosão corrigida em relação
à inibição da eclosão verificada na água destilada, utilizando a fórmula de
Abbott (Abbott, 1925):
Inibição da eclosão corrigida (%) = (IEe ' IEc) / (100 ' IEc) x 100em que:
IEe = inibição da eclosão cumulativa nos diferentes exsudatos radiculares (%)
IEc = inibição da eclosão cumulativa na testemunha (água destilada) (%).
Para a avaliação do efeito dos exsudatos radiculares de cada uma das cultivares
em cada um dos isolados foi estabelecida uma escala (Quadro_2).
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Em todos os isolados de Meloidogyne, o número de J2 eclodidos nos exsudatos das
quatro cultivares de S. sisymbriifolium(Sharp, Pion, Sis 4004 e Domino) foi
variável, tal como nas testemunhas, ao longo dos 15 dias de exposição. De forma
geral, verificou-se que em todas as cultivares, assim como nas testemunhas, a
percentagem de eclosão cumulativa foi maior nos primeiros seis dias. Em todas
as espécies de Meloidogyne, de modo geral, a eclosão dos J2 foi de 100% nas
testemunhas (água destilada e tomateiro). Os resultados obtidos com os
exsudatos radiculares das quatro cultivares de S. sisymbriifoliumforam
diferentes, sendo a percentagem de eclosão cumulativa, ao fim de 15 dias, na
sua maioria, inferior a 100%.
Os valores de IECC dos J2 de M. arenaria situam-se entre 12,15% (Pion) e 36,83%
(Sharp) para as cultivares de S. sisymbriifolium, enquanto na testemunha foi de
29,35%. Os valores de IECC dos J2 de M. chitwoodioscilaram entre 0,95% (Pion) e
12,78% (Sharp) e na testemunha foi de 2,20%. Os valores de IECC dos J2 de M.
haplaencontram-se entre 10,39% (Sis 4004) e 20,53% (Sharp) e na testemunha foi
de 5,60%. Os valores de IECC dos J2 de M. hispanicasituaram-se entre 3,28%
(Pion) e 24,28% (Sharp) e na testemunha foi de 10,39%. Os valores de IECC dos
J2 de M. javanicaencontram-se entre -2,62% (Sharp) e 11,69% (Pion) e na
testemunha foi de 0,91%. (Fig_1).
Os ensaios permitiram verificar que os exsudatos de algumas cvs de S.
sisymbriifoliumtêm maior eficácia sobre a inibição da eclosão dos J2 dos NGR do
que outras, tendo já sido referido, também, que espécies do mesmo género de
nemátodes podem apresentar comportamentos diferentes em relação ao exsudato das
mesmas plantas (Chitwood, 2002).
Quando se comparam os valores de IECC obtidos para os exsudatos do tomateiro
(testemunha) com os obtidos para as várias cultivares verifica-se que os
exsudatos de S. sisymbriifoliumtêm pouca influência na IECC de M. arenariaeM.
hispanica. No entanto, a cv. Sharp foi a que apresentou maior influência na
IECC destas duas espécies de nemátodos. Os resultados foram diferentes para as
restantes espécies.As cvs Sharp e Pion apresentaram maior influência na IECC de
M. chitwoodi e M. javanica, respectivamente. No caso da M. hapla, os exsudatos
das quatro cultivares de S. sisymbriifolium demonstraram ter maior influência
na IECC quando comparados com a testemunha (Quadro_3).
As cultivares de S. sisymbriifolium,que demonstraram possuir exsudatos com
propriedades inibidoras da eclosão dos J2, poderão ser utilizadas como
antagonistas naturais. Este parece ser um meio promissor no combate contra
estes nemátodes, sobretudo quando integrado em programas de rotações de
culturas ou como fonte de produtos com propriedades anti-nemátodes.
A utilização destas cultivares de S. sismbriifoliumnum sistema de rotação de
culturas ou como um nematodicida poderá ser um meio apropriado em Protecção
Integrada, mantendo as populações dos NGR a um nível suficientemente baixo para
que os prejuízos sejam economicamente toleráveis, evitando ou limitando a
utilização de produtos fitofarmacêuticos e aumentando a produção e a qualidade
das culturas.
Em conclusão, os resultados obtidos neste trabalho evidenciam a complexidade
das interacções existentes entre os NGR e S. sisymbriifolium; a variabilidade
fisiológica, que pode estar associada às populações destes nemátodes e às
cultivares de S. sisymbriifolium; e a importância de continuar estes estudos. É
fundamental conhecer as espécies de NGR presentes em cada campo e saber quais
as reacções relativamente às culturas que irão ser feitas. Este conhecimento
passa pela necessidade de se fazer a caracterização e identificação das
populações e pela realização de estudos de patogenicidade relativamente às
culturas habituais em cada região.
